علوم آزمایشگاهی

RFLP و VNTR

asemaneelm — Fri, 30 Oct 2009 12:56:50 GMT

RFLP: Resriction Fragmentation Lenght Polymorphism تکنیکی با استفاده از آنزیم های محدود کننده بر روی محصول تولید شده توسط PCR میباشد. آنزیم های محدود کننده بر اساس نوع توالی که میتوانند شناسایی نمایند قطعه DNA مورد استفاده را در همان مناطقی که داری توالی قابل شناسایی آنزیم میباشد برش داده و در نتیجه قطعه DNA را بر حسب تعداد برش به چندین تکه با سایزهای متفاوت تبدیل میکند که در مراحل بعدی به وسبله الکتروفورز بر روی ژل اگارز 3-2 درصد تعداد این قطعات و همچنین سایز انها قابل مشاهده میشود. از RFLP در تعیین گونه و نقشه برداری ژنتیکی ،پزشکی قانونی به همراه VNTR کاربرد دارد.

VNTR (تکرار متناوب از شماره های متغیر ) در واقع ردیفی کوتاه از چند نوکلئوتید با تکرار متناوب بر روی یک کروموزوم میباشد که بر روی کروموزوم های متفاوت وجود داشته و دارای طولی متغیر در بین افراد مختلف میباشد که از این تفاوت میتوان در بررسی های ژنتیکی در پزشکی قانونی، انگشت نگاری ژنتیکی و همچنین در تعیین والدین استفاده نمود.

در شکل شماتیک بالا بلوکهای مستطیلی نشان دهنده مناطق VNTR بوده و خطوط ضخیم نواحی عادی را نشان میدهد. این نواحی امکان برش مناطق VNTR را توسط آنزیم های محدود کننده و استخراج این نواحی را جهت تکثیر توسط PCR و یا بررسی های بیشتر توسط RFLP فراهم میسازد. در واقع این مناطق توسط PCR و متدهای RFLP تکثیر شده و سپس از طریق الکتروفورز بر روی ژل تعیین سایز میشود که بر حسب تفاوتهای فردی الگوی متغیر سایزی را نشان میدهد.

شمارش لنفوسیتهای TCD4

asemaneelm — Fri, 31 Jul 2009 14:10:24 GMT

لنفوسیتها گروهی از گلبولهای سفید خون میباشند که نقش مهمی را در اجرای پاسخ های ایمنی اختصاصی بدن بر ضد عوامل بیگانه به عهده دارند. این سلولها به ۲ گروه تقسیم میشوند که شامل لنفوسیتهای ‌B و لنفوسیتهای T میباشند. لنفوسیت های T نیز بر اساس مارکر سطحی شان به 2 گروه عمده لنفوسیت های T با مارکر CD4 و لنفوسیت های T با مارکر CD8 تقسیم میشوند. لنفوسیت ها با مارکر CD4 را عموما با عنوان سلولهای T کمک کننده یا Thelper و سلولهای T با مارکر CD8 را با عنوان لنفوسیتهای T کشده میشناسند که این 2 گروه نقش مهمی را در دفاع بدن علیه بسیاری از عوامل عفونی مانند باکتریها ، قارچه و حتی عوامل غیر عفونی را دارند. سلولهای T helper عمدتا با فعال کردن لنفوسیت های B و یا ماکروفاژها سبب از بین بردن عوامل عفونی شده و سلولهای CD8 مستقیما سلولهای سرطانی یا سلولهای آلوده به عوامل عفونی و داخل سلولی را از بین میبرد و باعث مرگ این سلولها میشود. سلولهای TCD4 مهمترین گروه سلولی تحت تاثیر توسط ویروس ایدز میباشد. این ویروس با اتصال به مارکرهای سطح سلول وارد این گروه از لنفوسیت ها شده و در این سلولها شروع به همانند سازی مینماید و در نتیجه باعث از بین رفتن این سلولها و کاهش تعداد انها میشوند. هدف اصلی در درمان بیماران HIV کند کردن روند کاهش سلولهای CD4 و ثابت نگه داشتن آنها در یک وضعیت به منظور جلوگیری از ابتلا فرد به بیماری ها و عفونت های مختلف میباشد. بنابراین لازم است که همزمان با درمان در این افراد تعداد سلولهای TCD4 اندازه گیری شود. از انجا که لنفوسیتهای TCD4 اولین گروه سلولهایی هستند که تحت تاثیر ویروس قرار گرفته و تعدا آنها سریعا کاهش میابد اندازه گیری آنها اندیکاتور مهمی برای ارزیابی میزان تاثیر درمانها و پیشرفت بیماری به سوی فاز نهایی ایدز میباشد ولی اندازه گیری این سلولها معمولا همراه با اندازه گیری پارامترهای دیگری چون سلولهای TCD8 و اندازه گیری تعداد کل لنفوسیتها و همچنین همراه با بررسی میزان بار ویروس در خون Viral load ارزشمند میباشد.

اندازه گیری این سلولها به 3 صورت انجام میپذیرد:

1- شمارش مطلق منحصرا سلولهای TCD4

2- شمارش سلولهای TCD4 و سلولهای TCD8 و بیان نسبت TCD4/TCD8.

3- شمارش تعداد TCD4 در کل لنفوسیتهای خون و بیان میزان این سلولها به صورت درصد.

نمونه مورد نیاز و روش اندازه گیری:

نمونه مورد نیاز برای این تست خون تام که روی ضد انعقاد EDTA گرفته شده است میباشد اساس اندازه گیری این سلولها نیز بر پایه روش فلوسیتومتری استوار میباشد. در این روش ابتدا خون با مقادیر مشخصی از آنتی بادی کنژوگه با مواد فلورسانس مانند فیکواریترین که ضد مارکر مورد اندازه گیری میباشد انکوبه شده و سپس سوسپانسون سلولی در دستگاه فلوسیتومتر آنالیز شده و مقادیر داده میشوند. در این روش اگر تنها از آنتی بادی بر ضد مارکر CD4 استفاده گردد تعداد TCD4 به صورت مطلق، اگر از آنتی بادی بر ضد مارکر CD4 و CD8 استفاده شود به صورن نسبت CD4/CD8 و اگر از انتی بادی علیه مارکر CD4 و CD45 که مارکر کل گلبولهای سفید میباشد استفاده گردد تعداد TCD4 به صورت درصد نسبت به جمعیت کل لنفوسیت های خون بیان میگردد. معمولا مقادیر زیر 200 در هر میکرولیتر خون در شمارش مطلق به عنوان محدوده بحران بیماری که منجر به بروز علائم ایدز میگردد محسوب میشود. تعداد این سلولها همچنین در بیمارن سرطانی که تحت شیمی درمانی هستند و همچنین در بیماریهای عفونی حاد مانند انفولانزا، پنومونی و هرپس سیمپلکس کاهش میابد. همچنین تعداد این سلولها در اوایل صبح کمترین مقدار و در شب بیشترین مقدار را دارند.

در پستهای بعدی مطالبی در مورد فلوسیتومتری تهیه میشود.

بررسی مایع منی Semen analysis

asemaneelm — Tue, 16 Jun 2009 20:30:03 GMT

Semen یا همان مایع منی مایعی سفید-شیری میباشد که حاوی سلولهای جنسی فرد مذکر ( Male) به نام اسپرم میباشد. اسپرم همانگونه که ذکر شد سلولهای جنسی مرد بوده که دارای یک سر و یک دم بوده و در سر خود یک نسخه از هر کروموزوم انسانی را داشته و بنا بر این حامل اطلاعات ژنتیکی جنس مذکر میباشند این سلولها در طی عمل لقاح با استفاده از دم خود حرکت نموده و خود را به سلول جنسی ماده میرساند. آزمایش بررسی مایع منی با عنوان اسپرموگرام یکی از آزمایشهای بسیار رایج در آزمایشگاه های تشخیص طبی میباشد. این تست غالبا در زوجهایی که با مشکلات نازایی مواجه هستند به منظور بررسی وضعیت سلامت مرد انجام میشود و نیز گاها در مردانی که عمل وازکتومی انجام داده اند به منظور بررسی موفقیت این عمل این تست درخواست میشود. به طور معمول پارامترهایی که روی semen اندازه گیری و بررسی میشود شامل موارد زیر میباشند:

1- حجم (Volum )

2- زمان سیالیت ( Liquation time)

3- درصد حرکت و همچنین ثبت درصد حرکت تند و کند به طور مجزا

4- غلظت ( Consistency )

5- درصد اسپرم های نرمال از نظر شکل و بلوغ

6- PH

7- ثبت تعداد گلبولهای سفید و سلولهای اپی تلیال و همچنین تعداد گلبولهای قرمز

8- تعداد

همانطور که واضح است مایع منی لازم است هم از نظر ماکروسکوپی و هم از نظر میکروسکوپی مورد بررسی قرار گیرد.

به منظور دستیابی به بهترین و ارزشمندترین نتایج در این تست لازم است مایع منی در همان محل آزمایشگاه جمع آوری شود و در غیر این صورت لازم است که ظرف حداکثر 30-20 دقیقه به آزمایشگاه و در همان دمای طبیعی محیط ارسال شود. در آزمایشگاه این مایع به مدت 30 دقیقه در دمای 37 درجه سانتیگراد قرار داده شده و پس از ان حتما در پاپان 30 دقیقه لازم است ابتدا میزان حرکت، بررسی مورفولوژی و تعداد سلولهای سفید و اپی تلیال با گرفتن یک لام مستقیم انجام شده و سپس حجم و PH نیز ثبت شود. به منظور شمارش نیز میتوان از نمونه رقت 20/1 تهیه کرده و با استفاده از لام نئوبائر در خانه های مربوط به WBC شمارش نموده و در عدد 200000 که طبق فورمول زیر به دست میاید ضرب میشود. تعداد به دست آمده بر حسب تعداد در هر میلی لیتر گزارش میشود.

تعداد شمارش شده x ضریب رقت ( 20 ) x 10 x ضریب تبدیل به میلی لیتر ( 1000)

تفسیر نتایج: معمولا حجم استاندارد بین 6-2 سی سی بوده که بر اساس آن میتوان به نتایج ارزشمندی دست یافت. از نظر تعداد معمولا تعداد زیر 20000000 دلیل بر ناتوانی مرد در بارور نمودن میباشد همچنین از نظر حرکت میزان حرکت بالای 50٪ و مرفولوژی نرمال در حد 60٪ با بالا مطلوب میباشد.

سایر تستهایی که میتوان بر روی مایع منی انجام داد نیز شامل

1- تست بررسی Sperm antibody در صورت غیر نرمال بودن نتایج

2-تست بررسی عملکرد اسپرم

3-تست Cryosurvival به منظور بررسی میازن دوام اسپرم در ذخیره طولانی مدت

4- Sperm viability test: به منظور بررسی میزان حیات اسپرم در مواردی که میزان اسپرم های زنده و متحرک بسیار کم باشند.

تولد

asemaneelm — Tue, 26 May 2009 07:58:13 GMT

همه ماه های سال زیبا هستند ولی از هرکسی بپرسی چه فصلی یا چه ماهی را دوست داره ناخداگاه اشاره به همون فصل و ماهی میکنه که توی اون متولد شده. برای منم بهار زیباترین فصل و خرداد بهترین ماه است. ۲۴ سال پیش یکی از همین روزای بهاری خدای مهربون خواست من هم باشم و بودن را تجربه کنم پس او گفت باش و من از دنیای عدم در لباسی پاک و معصوم به دنیای وجود پا نهادم . میگن تولد هر نوزاد نوید بخش این جمله است که خدا هنوز از انسان نا امید نشده، پس منم خیلی خوشحال هستم که تونستم یه موقعی فرصتی باشم برای معنای این جمله و الان در آستانه تولدم آرزو میکنم که ای کاش در این مسیر ۲۴ ساله خدارا ناامید نکرده باشم. اگرچه الان هنوز ۵ روز با روز تولدم فاصله دارم و اگرچه تبریک به خود یه مقداری خود خواهی باشه ولی من به هرحال یه پست را به خودم اختصاص دام و از همین جا به همه خرداد ماهی ها هم تولدشون را تبریک میگم.

ترپل تست ( Triple Test)

asemaneelm — Fri, 22 May 2009 18:59:18 GMT

یکی از نگرانیهای عمده در دوران بارداری بی اطلاعی از وضعیت سلامت جنین در حین دوره ۹ ماهه بارداری میباشد که به کمک مراقبتهای دوران بارداری و انجام تستهای مورد نیاز تلاش برای به حد اقل رساندن این نگرانیها شده است. از جمله برای بررسی وضعیت جنین از نظر ابتلا به ناهنجاری های کروموزومی تستهایی وجود دارد که در ۳ ماهه اول و دوم بارداری انجام میشود و ریسک ابتلا جنین را به اینگونه ناهنجاریها مشخص میکند که البته ماهیت تستها در سه ماهه اول و دوم بارداری متفاوت میباشد. این مطلب به بررسی تست تریپل Triple Test که در دوران 3 ماهه دوم بارداری انجام میشود میپردازد.

Triple Test:

تریپل تست یک تست ترکیبی از اندازه گیری 3 هورمون مهم تولید شده در این دوران میباشد که در هفته 20-15 حاملگی بنا به درخواست پزشک انجام شده و ریسک ابتلا جنین را به تریزومی 21و 18 و ناهنجاریهای لوله جنینی از جمله انسفالوپاتی را به طور آماری اندازه گیری میکند. برای تفسیر بهتر نتایج تست علاوه بر اندازه گیری پارامترهای 3 گانه نیاز به دانستن سن مادر، وزن مادر هنگام نمونه گیری و ناراحتیهای بالینی مادر از جمله دیابت میباشد.

مارکرهای مورد اندازه گیری در تریپل تست:

1- الفا فیتو پروتئین AFP: این هورمون توسط کبد جنین تولید شده و از طریق جفت وارد خون مادر میشود همچنین این هورمون وارد مایع امنیوتیک نیز میشود. میزان این هورمون تا هفته 12 حاملگی افزایش یافته و پس از آن شروع به کاهش تدریجی تا هنگام تولد مینماید.

2- B-Hcg: این هورمون مهمترین هورمون تولید شده در هنگام بارداری میباشد که توسط جفت ترشح شده و وارد خون مادر میگردد. این هورمون کمک به ترشح پروژسترون منماید و باعث حفظ جنین میگردد. میزان این هورمون در 3 ماهه اول بارداری افزایش یافته و پس از آن شروع به کاهش تدریجی نموده به طوریکه در هنگام تولد میزان این هورمون کمتر از 10% میباشد.

3- استریول آزاد Free Estriol: استریول نیز یکی از انواع استروژنها بوده که توسط کبد و غده آدرنال جنین و جفت تولید شده و وارد خون مادر میگردد. میزان این هورمون در حدود هفته 8 افزایش یافته و بعد از آن تا موقع تولد به تدیج افزایش میابد.

* اخیرا نیز به مجموع فاکتورهای فوق فاکتور جدیدی به نام Inhibin A اضافه شده است که باعث افزایش حساسیت و دقت تست میشود و تحت عنوان Quad Screen درخواست میشود. Inhibin A یک پروتئین دیمر تولید شده توسط جفت میباشد که در هفته 17-14 کاهش یافته و بعد از آن مجددا افزایش میابد.

تغییرات فاکتورهای ترپل تست در ناهنجاریها:

1- در تریزومی 21 ( سندرم داون ): در این اختلال میزان AFP و Free Estriol کاهش یافته و در مقابل میزان Hcgو Inhibin A افزایش میابد.

2- تریزومی 18: در این اختلال میزان Hcg و Free estriol کاهش یافته و میزان AFP متغیر میباشد.

3- اختلال نقص لوله های عصبی باز: در این مورد نیز میزان AFP افزایش قابل توجهی پیدا میکند.

تفسیر نتایج: نتایج تست همانطور که گفته شد با توجه به وضعیت بالینی مادر، سن دقیق بارداری، وزن مادر در هنگام نمونه گیری، تفسیر میشود. باید توجه شود که در صورت وارد نمودن اطلاعات غلط نتایج نادرستی نیز حاصل میشود. در نهایت بر اساس نتایج تست و اطلاعات وارد شده نموداری رسم میشود که بر اساس این نمودار فرد در محدوده نرمال بر اساس سن و یا خارج از این محدوده قرار میگیرد. افزایش ریسک بر اساس این نمودار به معنای ابتلای قطعی جنین به ناهنجاری نمیباشد بلکه تنها از نظر آماری در بین افراد با ریسک بالا قرار میگیرند و لازم است که به منظور تعیین دقیق ابتلای جنین به ناهنجاری تستهای تکمیل تری مانند آمنیوسنتز و تجزیه کروموزومی قرار انجام گردد.

لازم به ذکر است که این تست در تمام آزمایشگاه های تشخیص طبی ایران در زمانی کوتاه و با هزینه کم بر روی خون مادر انجام میگیرد.

تست D-Dimer

asemaneelm — Wed, 20 May 2009 07:52:18 GMT

همانطور که همه میدانیم در بدن در پی هرگونه آسیبی که به رگها وارد شود سیستم انعقادی فعال شده و با مصرف پلاکتها و فاکتورهای انعقادی اقدام به تشکیل لخته و در نتیجه ممانعت از خونریزی از رگ اسیب دیده مینماید. از وظایف مهم سیستم انعقادی میتوان به هموستاز اشاره نمود. در واقع این سیستم در هنگام جراحت با فعال کردن ابشار انعقادی باعث تشکیل لخته شده و از طرفی با فعال کردن فاکتورهای ضد انعقاد مانند آنتی ترومبین و پروتئین C, S مانع از تشکیل بی رویه لخته میشود. ماحصل فالیت سیستم انعقادی در اثر فعال کردن ابشار انعقادی تشکیل فیبرین وشبکه فیبرینی در محل جراحت میباشد که این شبکه بعد از بهبود محل اسیب دیده توسط پلاسمین شکسته شده و از بدن حذف میگردد. حاصل عمل پلاسمین روی لخته فیبرین تولید قطعات کوچکی تحت عنوان کلی FDP یا محصولات تولید شده از تخریب فیرین میباشد که از جمله این محصولات میتوان به D-Dimer اشاره نمود. پلاسمین یک آنزیم فیبرینولیتیک بوده که روی فیبرین اثر گذاشته و با عمل فیبرینولیزی خود باعث شکست پیوند بین واحدهای E و D فیبرین شده و ایجاد D-Dimer و سایر FDP را میکند.

D-Dimer در حالت طبیعی در بدن غیر قابل ردیابی میباشد و لی در مواردی اندازه گیری D-Dimer افزایش در مقدار این محصول را نشان داده و از نظر بالینی مهم محسوب میشود. از این رو تست اندازه گیری D-Dimer به عنوان یکی از تستهای مهم آزمایشگاهی در آمده است.

موارد درخواست تست D-Dimer:

این تست در موارد شک به افزایش تولید لخته از جمله در موارد زیر درخواست میشود:

- ترومبوز در سیاهرگهای عمیق بدن ( VDT): در این حالت لخته های کوچکی بدون جراحت خاصی به عروق در سیاهرگهای نواحی عمیق بدن مثل پا تشکیل شده و باعث بروز علائمی مانند درد و تورم در پا و اسیب به بافتهای مجاور میگردد. از طرفی گاها این لخته ها حرکت کرده و به قسمتهای مختلف بدن واردمیشوند و علائم خاص محل را ایجاد میکنند از جمله در ریه ها ایجاد امبولی ریویPE ، در قلب باعث گرفتاری ماهیچه های قلب و یا دریچه های قلب و در مغز باعث عوارض مغزی ماننند سکته مغزی میکند.

- PE ( Polmunary Embolism : در این حالت همانطور که قبلا ذکر شد لخته به ریه ها امده و ایجاد مشکلات تنفسی و درد در قفسه سینه میکند.

- DICیا انعقاد منتشره داخل عروفی: این حالت به دنبال جراحی ها، عفونتهای سپتیک، سوختگی و یا در زنان باردا بعد از زایمان اتفاق می افتد که در این بیماری فاکتورهای انعقادی مرتب مصرف شده و باعث ایجاد لخته های ریز در کل بدن میشود و از طرفی عمل سیستم فیبرینولیتیک نیز فعال شده و باعث لیز لخته میشود که این افراد شدیدا مستعد خونریزی میباشند. در این افراد به دنبال بروز علائمی مانند تهوع، تشنج، خونریزی، درد شدید شکمی و ماهیچه ها و الیگوری تست D-Dimer همراه با تست PT, PTTو اندازه گیری میزان فیبرینوژن و شمارش پلاکتی درخواست میشود.

روش انجام تست:

مناسب ترین روش در اندازه گیری D-Dimer روش الایزا میباشد که در این روش با استفاده از آنتی بادی منوکلونال ضد این ماده به ردیابی آن میپردازند.

خصوصیات تست:

این تست دارای حسایتی حدود 95% و اختصاصیتی حدود 50% میباشد بنابراین این تست به تنهایی ملاک تشخیص ناهنجاری های سیستم انعقادی نمیباشد و همراه با شایر تستها و علائم بالینی میتوان به تشخیص رسید.

موارد مثبت کاذب این تست : در جراحی، بارداری، تروما، عفونتها و التهابات شدید، ارتریت روماتوئید شدید، بدخیمی و بیماری های کبدی مقادی D-Dimer بدون ارتباط با وجود ترومبوز افزایش دارد.

موارد منفی کاذب: در صورتیکه بر حسب اتفاق نمونه گیری در فاصله بسیار کمی بعد از تشکیل لخته در بدن انجام شده باشد این تست منفی میباشد. همجنین در صورت استفاده از آنتی کواگولان ها به دلیل جلوگیری از تشکیل لخته این تست منفی میشود. تاخیر زیاد در انجام تست نیز باعث بروز منفی کاذب میگردد.

رنگ آمیزی گرم

asemaneelm — Mon, 04 May 2009 20:16:18 GMT

مقدمه

رنگ‌آمیزی گرم

رنگ‌آمیزی گرم (Gram staining) یکی از مهم‌ترین ومتداولترین روش‌های رنگ آمیزی در میکروبیولوژی است که اولین بار توسط کریستین گرم ابداع شد. دراین رنگ آمیزی باکتری‌ها بر مبنای رنگ باکتری پس ازرنگ آمیزی به دودسته گرم مثبت و گرم منفی تقسیم می‌شوند. رنگ باکتری پس ازرنگ آمیزی به توانایی حفظ رنگ اول وبه عبارتی به ساختمان دیواره سلولی باکتری بستگی دارد. دررنگ آمیزی گرم باکتری‌های گرم مثبت پس ازرنگ آمیزی به رنگ بنفش وباکتری‌های گرم منفی به رنگ قرمز مشاهده می‌شود. گرچه هر دو گروه یعنی باکتری‌های گرم مثبت و منفی دارای دیواره می‌باشند ولی فرق بین این دو گروه مربوط به خواصی است که در ساختمان دیواره سلولی آنها وجود دارد. اساس ساختمان در دیواره سلولی باکتری‌های گرم مثبت یک لایه ضخیمی‌است از پپتیدوگلیکان^*[۱]، ولی در باکتری‌های گرم منفی ضخامت آن به حداقل می‌رسد.

هدف:

از رنگ امیزی گرم به دو جهت استفاده می شود:

- شناسایی جنس باکتری

-آنتخاب آنتی بیوتیک مناسب (باکتری های گرم مثبت در مقایسه با باکتری های گرم منفی نسبت به پنی سیلین G حسّاسیت بیشتری دارند)

با این حال همه یباکتری ها را نمی توان با رنگ امیزی گرم مشاهده نمود.

مواد مورد نیاز:

لام‘سرم فیزیو لژی‘لوپ‘رنگ کریستال ویوله‘رنگ لوگل‘الکل استون‘رنگ سافرانین‘میکروسکوپ

روش رنگ‌آمیزی گرم

پیش از آغاز رنگ آمیزی نخست باید یک فروتی از محیط کشت خالص باکتری بر روی لام تهیّه کنیم، در ادامه مراحل رنگ آمیزی گرم به قرار زیر هستند:

نخست رنگ کریستال ویوله رابه مدت ۳۰ تا ۴۵ ثانیه برروی فروتی باکتری روی لام می ریزیم، درنتیجه همه باکتری‌ها به رنگ بنفش درخواهد درآمد.

پس از شستشوی فروتی با آب، رنگ کریستال ویوله را با افزودن لوگول به مدّت ۳۰ تا ۴۵ ثانیه تثبیت می کنیم. لوگل باکریستال ویوله ترکیب شده وایجاد کمپلکس‌هایی می‌نمایید که باعث تثبیت رنگ کریستال ویوله درداخل دیواره سلولی باکتری می‌شود. پس ازاین مرحله، همه باکتریها کماکان به رنگ بنفش مشاهده می‌شوند .

مرحله رنگ زدایی:

مهم‌ترین مرحله رنگ آمیزی است. دراین مرحله پس از شستشو لام با آب لام به مدت ۱۵ تا۲۰ ثانیه در معرض موادرنگ زدا مانند الکل استون قرار می‌گیرد سپس با آب مورد شستشو قرار می‌گیرد. درباکتریهای گرم منفی که دارای لایه‌های پپتیدو گلیکان محدود وغشای خارجی غنی از چربی هستند این حلال باعث حذف این لایه‌ها وغشا می‌گردد وباکتری رنگ مراحل قبل راازدست می‌دهد. ولی درباکتریهای گرم مثبت به علت ضخامت زیاد لایه ی پپتیدوگلیکانی وعدم وجود لیپید فراوان در غشا رنگ مرحله قبل ازغشا خارج نمی‌شود .درنتیجه پس ازاین مرحله باکتریهای گرم منفی بی رنگ ولی باکتریهای گرم مثبت کماکان بنفش باقی خواهند ماند .در انتها سطح فروتی راباسافرانین یا فوشین (قرمز رنگ) به مدت ۳۰ تا ۴۵ ثانیه می‌پوشانیم سپس باآب شستشو داده و پس از خشک شدن با میکروسکوپ مورد بررسی قرار می گیرد.

نتیجه:

دراین مرحله باکتری‌های بی رنگ (باکتری های گرم منفی) به رنگ قرمز درمی‌آیند وباکتری‌های بنفش (باکتری های گرم مثبت) بدون تغییر رنگ باقی می‌مانند .

ارسال توسط دوست گرامی جناب اقای رضا مدیر وبلاگ آزمایشگاه پزشکی پاستور.

asemaneelm — Tue, 21 Apr 2009 08:46:18 GMT

سلام به جناب اقای احسان طلایی عزیز . شما و سایر دوستانی که در قسمت نظرات سوالی را مطرح میکنید میتونند جواب سوالاتتون را در همان قسمت نظرات مشاهده کنید.

همچنین از همه دوستان بار دیگر برای شرکت بحث مشکلات جامعه ازمایشگاه و راهکارهایی برای حل آنها در قسمت نظرات دعوت مینمایم.

با تشکر

مشکلات جامعه آزمایشگاه تشخیص طبی

asemaneelm — Mon, 20 Apr 2009 18:00:51 GMT

میخوام از همه دوستای آزمایشگاهی دعوت کنم که در قسمت نظرات وبلاگ و یا در جعبه پیامهای وبلاگ نظراتشون را در مورد مشکلات جامعه آزمایشگاهی و راه حل هایی برای رفع این مشکلات مطرح کنند. شاید کاری به ظاهر نشه کرد ولی گاهی حرکت های به ظاهر ناچیز و کوچک میتونه سراغاز یه تحول بزرگ باشه. در زیر نظر یکی از دوستان مطرح شده. منتظر نظرات شما نیز هستیم.

*باید بگم شاید منشا مشکلات ما نفوذ بیشتر پزشکان پاتولوژیست بر جامعه آزمایشگاهی باشد که مانع از ارایه نظرات دکترین علوم آزمایشگاهی که آنها نیز جزو این جامعه محسوب می شوند می باشد.
وقتی که پای صحبت دانشجویان هم رشته می نشینیم اولین چیزی که ابراز میکنند عدم انگیزه برای ادامه تحصیل به علت آینده نامشخص است البته تمام دانشجویان این طور نیستند.
گاهی اوقات که با کارمندان مشغول کار در این حیطه صحبت می کنم از عدم مکفی بودن حقوق و مزایای این رشته می گویند
به امید روزی که در این کشور به تمام مشاغل و رشته های درسی به یک چشم نظر افکنند و تمام رشته ها مهم و حیاتی تلقی شوند و این میسر نیست مگر با تغییر دیدگاه مردم نسبت به فرهنگ کنونی که در آن تمام پدر و مادر ها دوست دارند که فرزندانشان در آینده دکتر یا مهندس شوند که بیشتر بر جنبه عنوان اجتماعی افراد استوار است و قاعدتا این را به نسل بعدی منتقل خواهند که مصداق این موضوع را وقتی می بینیم که معلم دبستان برای زنگ انشا موضوع آشنایی که "دوست دارید در آینده چه کاره شوید را" می دهد .

* و اما به نظر من باید ترتیبی داده بشه که امکان ادامه تحصیل در مقطع کارشناسی ارشد و دکترا در خود رشته علوم آزمایشگاهی فراهم باشه و حق تاسیس آزمایشگاه طبی تنها در اختیار فارغ التحصیلان دکترای علوم آزمایشگاهی و اجازه تاسیس آزمایشگاه پاتولوژی هم در اختیار پزشکان محترم پاتولوژیست قرار داده بشه و در نتیجه لازمه تاسیس آزمایشگاه کلینیکال و پاتولوژی منوط بر همکاری هردو پزشک پاتولوژیست و آزمایشگاه با یکدیگر باشه. این درست نیست که فارغ التحصیل آزمایشگاه تنها امکان ادامه تحصیل تک رشته ای داشته باشه که برای تاسیس ازمایشگاه با مشکل روبرو بشه ولی زمینه برای نفوذ و تسلط پزشکان پاتولوژیست هرروز بیشتر از روز قبل بشه.

روز علوم آزمایشگاهی

asemaneelm — Sun, 19 Apr 2009 08:26:18 GMT

نمیدونم از چی بگم و یا با چی شروع کنم. در دنیای امروز پزشکی شاید بشه گفت که آزمایشگاه مهمترین نقش را در زمینه ی تشخیص بیماری ها و حتی درمان و پیگیری درمان دارد ولی متاسفانه کمترین اهمیت به این بخش داده میشه. ۳۰فروردین به نام روز علوم آزمایشگاهی است ولی در تقویم رسمی کشور این روز به این نام هنوز ثبت نشده است و طبیعتا توجهی که باید به این رشته بشه هنوز نشده .حتی در بین دانشگاه های علوم پزشکی تنها برخی از دانشگاه ها به این روز توجه میکننددر صورتی که میتونه این روز هم فرصتی باشه برای تقدیر از برترین های این رشته و همچنین ارتقای سطح علمی آزمایشگاه ها ولی...

گاهی فکر میکنم اگه فقط ۱ روز همه آزمایشگاه ها در هر نقطه ی کشور تعطیل شوند با تمام احترامی که برای پزشکان و نقش آنها در سلامت جامعه قائلم ولی حتی حاذق ترین پزشکان در تشخیص صحیح و دقیق یک بیماری صرفا بر اساس علائم بالینی دچار مشکل میشوند.

به هر حال امیدوارم در آینده ای نزدیک این رشته جایگاه واقعی خود را در بین جامعه پزشکی پیدا کرده و بتونیم روز بزرگداشت حکیم جرجانی(روز علوم آزمایشگاهی) را در روز ۳۰وردین در تقویم رسمی ایران ثبت کنیم.

این روز بر همع دانشجویان و شاغلین آزمایشگاه گرامی باد.