علوم آزمایشگاهی
وبلاگی در مورد علوم پزشکی و به ویژه علوم آزمایشگاهی و000
A saliva test that detects estriol, a type of estrogen, may help determine if a pregnant woman is at risk of premature delivery, researchers report. Estriol, in addition to being produced by the mother is also produced by the fetus and placenta. Levels increase gradually in pregnancy and then surges in the weeks before labor.
Investigators measured estriol levels in the saliva of nearly 1,000 pregnant women at 8 US medical centers on a weekly basis starting from the 22nd week of pregnancy. Approximately 32% of the women were considered to be at high risk of having a premature baby. "Regardless of a woman's risk classification, the risk of preterm birth was substantially higher in women with at least one elevated salivary estriol test," according to Dr. R. Phillip Heine of the University of Pittsburgh in Pennsylvania, and colleagues. کاربردهای PCR: 1- جداسازی DNA : با این روش میتوان قطعه ای از DNA را از ژنوم استخراج نمود و در روشهایی مثل روشهای بلاتینگ به منظور تولید پروب و همچنین در روشهای کلونینگ و نیز به منظور تعیین توالی DNA یک نوع سلول استفاده نمود. همچنین از DNA استخراج شده میتوان در موارد پزشکی قانونی برای تعیین هویت استفاده نمود. ( تهییه اثر انگشت DNA) 2- تکثیر و تعیین مقدار DNA: با روش PCR میتوان مقادیر بسایر اندک موجود در هر نمونه ای را تکثیر نمود و مورد بررسی قرار دا که این روش به خصوص در مواردی مانند بررسی DNA اندک موجود در فسیل ها و حیوانات قدیمی و به عبارتی در تحقیقات باستانشناسی حائز اهمیت میباشد. همچنین به کمک روشی از PCR تحت عنوان Real-Time PCR میتوان مقدار دقیق DNA موجود در نمونه را بررسی نمود که این روش کمی از PCR به خصوص در مورد عفونتهایی مانند ایدز که نیاز به بررسی Virus Load دارند بسیار مفید میباشد. 3- کاربرد در پزشکی: PCR به عنوان یک روش بسار مناسب در بررسی اولیه بیماریهای بدخیم مانند لینفوما ها و لیپوم ها و به ویژه بررسی جابه جایی های کروموزومی بسیار ارزشمند میباشد. همچنین PCR روشی مناسب در بررسی بسیاری از میکرو ارگانیسم های سخت رشد مانند مایکوباکتری ها، باکتری های بی هوازی و ویروسها میباشد. از روش کمی PCR نیز (RT-PCR) در اندازه گیری میزان ویروس در بدن میتوان استفاده نمود. روش PCR بر روی 200-10 میکرولیتر نمونه که در تیوب هایی کوچک ریخته شده و در دستگاه قرار داده میشود انجام میشود. سیکل کامل PCR شامل چندین مرحله همراه با تغییرات دمایی میباشد که به ترتیب این مراحل به صورت زیر میباشد: 1- مرحله ابتدایی یا آغاز گر: این مرحله، مرحله ابتدایی به منظور فعالسازی آنزیم DNA Polymerase میباشد که در این مرحله دما به حدود 96-94 درجه سانتیگراد در مدت 9-1 دقیقه میرسد. 2-Denaturaion Step ( مرحله دناتوراسیون): این مرحله به مدت 30-20 ثانیه در دمای 96-94 درجه سانتیگراد میباشد که باعث شکسته شدن پیوندهای هیدروژنی بین 2 رشته DNA و در نتیجه جدا شدن 2 زنجیره از یکدیگر میشود. 3-Annelieng step : در این مرحله دما به 65-50 ( 3-2 درجه پایین تر از دمای ذوب پرایمر میباشد)درجه سانتیگراد کاهش میابد و این دما به مدت 40-20 ثانیه بر سیستم حاکم میباشد. در اینم مرحله پرایمر مورد استفاده با تک رشته های DNA باند شده و توسط آنزیم پلی مراز سنتز DNA آغاز میشود. پرایمر مورد استفاده از نظر توالی لازم است که کاملا به تک رشته DNA مورد نظر جفت شود بنابراین توالی DNA مورد نظر از قبل باید شناسایی شده باشد. 4- مرحله طویل سازی: در این مرحله مجددا دما افزایش یافته و به حدود 72 درجه سانتیگراد میرسد البته این دما بستگی به نوع آنزیم دارد که برای Taq Polymerase حدود 80-75 میباشد که اغلب در حدود 72 درجه استفاده میشود. در این مرحله آنزیم پلی مراز دزوکسی نوکلئوزید تری فسفات ها dNTP را در جهت 5 به 3 اضافه میکند و رشته جدید را سنتز میکند. زمان مورد نیاز بسته به نوع آنزیم مورد استفاده و طول DNA مورد نظر متفاوت میباشد. معمولا آنزیم پلی مراز اغلب قدرت اضافه کردن 1000 باز را در هر دقیقه دارد. 5- مرحله نهایی طویل سازی: این مرحله به مدت 15-5 دقیقه در دمای 74-70 به منظور اطمینان توسعه همه بقایای DNA تک رشته ای صورت میگیرد. 6- مرحله آنالیز: در این مرحه محصولات PCR به ژل آگارز آکریل آمید انتقال داده شده و تحت تاثیر جریان الکتروفورز قطعات بر اساس وزن مولکولی از یکدیگر جدا شده و در نهایت با استفاده از یک DNA رهبر یا الگو که حاوی قطعاتی با وزن مولکولی مشخص میباشند محصولات جدا شده شناسایی میشوند. Polymerase Chain Reaction که به اختصار PCR نامیده میشود روشی پر کاربرد در حیطه مولکولی میباشد که با استفاده از آنزیم DNA پلی مراز اقدام به تکثیر و تولید میلیونها نسخه DNA از میزان کمی از این ماده میکند. این روش روشی پر کاربرد و پر استفاده در حیطه تشخیص بسیاری از بیماریها، پزشکی قانونی و بسیاری از دستکاریهای ژنتیکی میباشد. اساس این روش بر پایه یک سیکل حرارتی و تغییرات دمایی است بنابراین لازم است از آنزیمهایی که مقاوم در برابر حرارت هستند استفاده نمود مانند Taq Polymerase که از گونه ای از باکتری به نام Thermus aquaticus به دست میاید. برای انجام روش PCR نیاز است که توالی قطعه DNA مورد هدف از قبل شناسایی شده باشد تا بتوان پرایمر مناسب را جهت همانند سازی و آغاز تکثیر طراحی نمود. در اغلب تکنیکها نیز حداکثر وزن قطعه مورد هدف باید 10Kbp باشد البته تکنیکهایی با قدرت تکثیر قطعات بزرگتر تا 40Kbp نیز وجود دارد. اجزا مورد نیاز: شامل 1- DNA الگو که قرار است تکثیر شود. 2- آنزیم پلی مراز مناسب 3- داکسینوکئوزیدتریفسفات dNTP 4-کاتیونهای 2 ظرفیتی که عمدتا Ca کلسیم استفاده میشود. منگنز Mn نیز به عنوان یه عامل موتاژن در مواقع نیاز استفاده میشود. و کاتیونهای تک ظرفیتی مانند پتاسیم. 5- بافر که ایجاد یک محیط شیمیایی مناسب را برای انجام عملیات میکند. ۶- پرایمر: قطعه از RNA که برای آغاز همانند سازی و شروع به کار DNA پلیمراز لازم است. روش انجام PCR را در پست بعدی آماده میکنم. با تشکر از phasco.ir

![]()




ويتامين C در گروه ويتامينها قرار دارد و به شکل قرصهاي 100 و 250 ميليگرمي و قرص جوشان 1000 ميليگرمي، پودر 500 ميليگرمي و آمپول 500 ميليگرمي در داروخانههاي کشور موجود است. اما قرص جوشان آن به ويژه در فصول سرد سال طرفدار بيشتري پيدا ميکند.
ويتامين C، ويتامين محلول در آب است که از اجزاي ضروري براي ساخت و نگهداري کلاژن و بافت محيطي بين سلولي است. مصرف اين دارو سبب تقويت دستگاه ايمني و افزايش سرعت بهبود زخم ميشود، همچنين از تشکيل نيتروزآمينها و نيتروز اورههاي سرطانزا جلوگيري ميکند.
موارد مصرف ويتامين C در پيشگيري و درمان بيماري اسکوروي، کمک به درمان سوختگيهاي شديد، بهبود شکستگي يا زخم بيماريهاي مزمن است.
ميزان مصرف اين دارو بر اساس نوع بيماري تعيين ميشود. بهطور مثال، در درمان بيماري اسکوروي روزانه 100 ميلي گرم تا 2 گرم از راه خوراکي يا تزريقي مصرف ميشود يا در سوختگيهاي شديد روزانه 200 تا 500 ميليگرم به وسيله پزشکان توصيه ميشود.
اسيداسکوربيک نيز مانند داروهاي ديگر عوارضي از خود نشان ميدهد که اغلب دستگاه عصبي، پوست، گوارش و ادراري را درگير ميکند. شايعترين اين علايم شامل سرگيجه، درد در محل تزريق، اسهال، سوزش سردل، افزايش دفع ادرار يا تخريب دندانها با مصرف طولاني مدت قرصهاي جويدني است.
افراد دچار کمبود آنزيم G6PD بايد از مصرف زياد اين دارو بپرهيزند زيرا احتمال بروز کمخوني در اين افراد با مصرف اسيداسکوربيک محتمل است.
ويتامين C تزريقي در معرض نور به تدريج تيره ميشود اما تغيير رنگ جزيي تاثيري در اثر درماني آن ندارد.
ويتامين C تزريقي را ميتوان به صورت رقيق شده يا رقيق نشده استفاده کرد.
از محلول خوراکي ويتامين C ميتوان همراه غذا استفاده کرد.
قرصهاي جوشان اين ويتامين را بايد در يک ليوان آب حل و بلافاصله مصرف کرد.
ويتامين C را در ظروف غيرفلزي مقاوم در برابر هوا، دور از حرارت و نور خورشيد در دماي 15 تا 30 درجه سانتيگراد نگهداري کنيد.
مصرف زياد اين دارو در دوران بارداري توصيه نميشود. همچنين سيگاريها و افرادي که قرص ضدبارداري مصرف ميکنند، نياز به مصرف ويتامين بيشتري به صورت مکمل دارند.
درباره اين ويتامين، مهمترين توصيهاي که به خانوادهها گفته ميشود، اين است که براي تامين ويتامين C لازم به منابع غذايي طبيعي توجه بيشتري نشان دهند تا دارو.
ويتامين C ميتواند سبب افزايش توان جذب آهن شود.



